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科研服務(wù)

SCIENTIFIC SERVICE

基因敲除細(xì)胞系的建立

1.服務(wù)信息

 

流程分布

周期工作日

提交內(nèi)容

CRISPR設(shè)計

2

專業(yè)設(shè)計報告

客戶確認(rèn)

1-2

客戶回復(fù)

引物合成

2

獲得引物

質(zhì)粒構(gòu)建，引物測試及目標(biāo)基因擴(kuò)增

  6   

階段報告

  質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞

6-8

階段報告（提供熒光照片）

    活性驗證

7-10

階段報告

  獲得單克隆細(xì)胞

35

獲得30個細(xì)胞株

單細(xì)胞株突變體鑒定

10

總結(jié)報告

總周期：3-3.5月

 

2.基因組編輯動物細(xì)胞系建系流程圖：

　　

 

3.服務(wù)流程

 



案例說明

案例展示

案例說明

Ｘ

　　建立基因組編輯細(xì)胞系的優(yōu)選策略之多個sgRNA同時使用以高效實現(xiàn)目標(biāo)基因的靶向突變：

　　雖然有報道利用一對sgRNA，可以刪除長至200 kb的基因組DNA片段，但是刪除100-200 bp相較而言更容易實現(xiàn)，更為重要的同時使用多個sgRNA，可顯著提高基因組靶向突變的成功率，如果實現(xiàn)刪除則有利于后面篩選時的基因型鑒定。

　　在哺乳動物的基因組編輯中，一般建議同時使用(測試)3個sgRNA

　　以提高工作效率

　　

參考文獻(xiàn)
參考文獻(xiàn)

參考文獻(xiàn)

Ｘ

參考文獻(xiàn)

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